Thu nhận enzym cellulase của Trichoderma reesei trên môi trường bán rắn

Trần Thạnh Phong, Hoàng Quốc Khánh, Võ Thị Hạnh, Lê Thị Bích Phượng, Nguyễn Duy Long, Lê Tấn Hưng, Trương Hồng Vân, (2007), “Thu nhận enzym cellulase của Trichoderma reesei trên môi trường bán rắn”,Tạp chí phát triển KH & CN- ĐHQG Tp. HCM, Tập 10, số 07, tr. 17-24.

Abstract:

Mục tiêu của bài báo là nghiên cứu thu nhận cellulase Trichoderma reesei VTT-D-80133 sinh trưởng trên môi trường bán rắn với cơ chất bã mía kết hợp với cám mì. Tỷ lệ BM:CM (7:3), 8 lần nồng độ dinh dưỡng, độ ẩm ban đầu 60%, thời gian nuôi cấy 7 ngày là tối ưu cho T. reesei VTT-D-80133 sinh tổng hợp cellulase trên môi trường lên men bán rắn.Hoạt tính và hiệu suất sinh tổng hợp cellulase ở điều kiện trong bình tam giác là CMCase (Carboxymethyl cellulase) 280,64 IU/g và FPU (Filter Paper Unit) 5 IU/g; thấp hơn 3,2 và 37 lần so với chế phẩm Amano T (cellulase được sản xuất từ T. reesei) của Hãng AMANO. Ngoài cellulase, canh trường còn chứa: α-amylase 368,75 UI/g, protease 12,43 UI/g và xylanase 10073,25 BXU/g. Cellulase thu nhận được có khả năng đường hóa 21% giấy in đã qua sử dụng (10%) và qua phân tích trên gel polyacrylamide có các vạch protein có trọng lượng phân tử bằng với các vạch protein có trong chế phẩm Amano T.
Sugarcane baggase/wheat bran ratio, initial moisture content, concentration of basal medium and cultivation time were optimized in solid state fermentation (SSF) for the production of cellulase by an Trichoderma reesei VTT-D-80133 mutant using experiment optimization. Sugarcane baggase/wheat bran ratio (7/3), initial moisture content of 60%, 8 times concentration of basal medium and cultivation time of 7 days were optimum for cellulase production in SSF. The activity and productivity of cellullase obtained after 7 days of fermentation were 280,64 IU/g and 5 FPU/g of fermented medium; These activities are lower than 3,2 and 37 times compared with commercial cellulase (Amano T) of AMANO Company (Japan). Besides cellulase, fermented substrate contain activities of α-amylase 268,75 UI/g, protease 12,43 UI/g and xylanase 10073,25 BXU/g. The cellulase extract was shown to have some bands that their molecular weights are equivalent to commercial cellulase (Amano T) by sodium dodecyl sulphate poly-acrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). At the filter paper activity of cellulase was 5 FPU/ml, the yield of enzymatic hydrolysis of paper waste was 21%. The sugars (23,62 mg/ml) converted from paper waste by cellulase could be used further in the fermentation of valuable products.

Xem thêm: http://www.vnulib.edu.vn:8000/dspace/handle/123456789/2968